糞便的化學(xué)檢查有酸堿度反應(yīng)、隱血試驗、膽色素和脂肪測定等，其中隱血試驗有重要的臨床應(yīng)用價值，上消化道出血量

小于5ml，糞便中無可見的血液，且紅細胞破壞，顯微鏡檢查也未見紅細胞，而需要用化學(xué)法、免疫法、轉(zhuǎn)鐵蛋白法、

血紅蛋白熒光測定法等才能證實的出血，稱為隱血，檢查糞便隱血的試驗稱為糞便隱血試驗(fecal occult blood test ,

FOBT)，化學(xué)法常用試劑有鄰聯(lián)甲苯胺、匹拉米洞、愈創(chuàng)木脂、無色孔雀綠、米土爾等。                  

隱血定性檢測試劑盒(鄰聯(lián)甲苯胺法)的檢測原理是血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有類似過氧化物酶的活性

，能催化H2O2作為電子受體使色原底物鄰聯(lián)甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯綠色→藍色，其顏色深淺與血紅蛋白含量成正比

，根據(jù)顯色的快慢可以半定量血紅蛋白即隱血含量，因此也可稱作糞便隱血半定量試驗，多用于人或動物糞便血紅蛋白檢查

，應(yīng)注意的是正常人或動物消化道也會微量出血或受到刺激后出血或模型動物飼料含有魚粉、鐵劑等，都可能導(dǎo)致試驗結(jié)果

出現(xiàn)假陽性，本法特點是靈敏度高、假陽性高，可檢出Hb 0.2~1.0μg/ml，可聯(lián)合使用中靈敏度、中特異性的匹拉米洞法

。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml，立即取下針頭，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動秒表計時，并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次，觀察管內(nèi)血液流動情況，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時間，即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時間的平均值作為ACT 值。

計算：參考區(qū)間： (1.77±0.76)min

4、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品，按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制，使?jié)舛冗_到60μg/ml，如果檢測組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制，使?jié)舛冗_到60μg/ml。

注意事項:

1、實驗材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于-20°C.

2、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水，并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液，有腐蝕性，請小心操作。

4、TA標(biāo)定液容易長菌，宜4℃保存，一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用。

5、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進行滴定。

6、TA滴定液含量計算公式中，V0最好為3次空白測定的平均值。

7、如果所測樣品的濃度過高，應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定，并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8、如果樣品顏色較深，滴定終點不易觀察，應(yīng)采用電位滴定法。

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